荧光分光光度计基本原理

由氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态， 这些处于激发态的分子是不稳定的，在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出，从而产生荧光．不同物质由于分子结构的不同，其激发态能级的分布具有各自不同的特征，这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱；，因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。在溶液中，当荧光物质的浓度较低时，其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系，Edinburgh荧光光谱代理，即IF=KC，利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析，与紫外-可见分光光度法类似，荧光光谱代理，荧光分析通常也采用标准曲线法进行。

荧光分光光度计测试注意事项

①样品应盛在四面透光的石英比色皿（荧光池）中，如果是挥发性样品应使用带塞的荧光池。

②在荧光分析时，为了得到稳定且可靠的数据，一般需要开机预热氙灯大约30min。如果仪器光源采用的是闪烁氙灯，预热时间可以缩短到10min左右。对某些易感光、易分解的荧光物质，爱丁堡荧光光谱代理，尽量采用长波长、低人射光强度及短时间光照。

③温度变化可引起荧光强度的改变。通常降低温度，有利于提高荧光量的子产率，荧光强度增大。温度影响荧光强度的显著程度因样品而异，大部分荧光物质的荧光强度受温度影响不大，国产荧光光谱代理，测试温度变化不超过±3℃，对测试结果几乎无影响。

④当荧光物质是弱酸或弱碱时，溶液的pH对荧光强度有较大影响。因为弱酸或弱碱在不同酸度中，分子和离子的电离平衡会发生改变，而荧光物质的荧光强度会因其离解状态发生改变。

⑤分子结构中存在π-π共轭的荧光物质在极性溶剂中，荧光效率显著增强。溶液中表面活性剂的加入能够显著提高荧光强度。

⑥瑞利散射和拉曼散射是溶剂的两种散射光，应注意不要误把瑞利散射和拉曼散射光谱当做荧光光谱。瑞利散射光波长与激发光波长相同，拉曼散射与激发光波长不同，而荧光物质的荧光波长与激发光波长无关，因此可以通过选择适当的激发波长将拉曼散射光与荧光分开。在测试时选择合适的狭缝宽度，或者空白扣除，也可以对散射光的影响进行校正。

⑦荧光物质分子与溶液中其它物质分子之间作用导致荧光强度降低，常见的荧光猝灭剂，如卤素离子、重金属离子、硝基化物质、重氮化合物等。

⑧测试过程中注意不要肉眼盯着氙灯光源看，以防眼睛造成损伤。

⑨仪器房应注意经常通风，避免产生的臭氧在室内富集。

荧光光谱

1852年Stokes在考察奎宁和叶绿素的荧光时，用分光计观察到荧光波长比入射光波长稍长些。经过判明，这种现象不是由光的漫射作用引起的，而是这些物质在吸收光能后重新出的不同波长的光。因此，他引入荧光是光发射的概念。荧光光谱先要知道荧光，荧光是物质吸收电磁辐射后受到激发，受激发原子或分子在去激发过程中再发射波长与激发辐射波长相同或不同的辐射。当激发光源停止辐照试样以后，再发射过程立刻停止，这种再发射的光称为荧光。

爱丁堡荧光光谱代理-荧光光谱代理-泰科施普(查看)由泰科施普（北京）技术有限公司提供。泰科施普（北京）技术有限公司为客户提供“红外光谱仪，台式核磁，热解析仪，气相色谱仪，水活度”等业务，公司拥有“Bruker,Nanalysis,泰通,Aqualab”等品牌，专注于科研仪器仪表等行业。，在北京市海淀区太平路甲40号金玉元写字楼E座107室的名声不错。欢迎来电垂询，联系人：卜经理。