荧光光谱仪原理
荧光分析法的基本原理
处于基态的被测物质的分子在吸收适当能量,如光、化学、物理能后,其共价电子从成键分子轨道或非键分子轨道跃迁到反键分子轨道上去,形成分子激发态。分子激发态不稳定,将很快衰变到基态。在分子激发态返回到基态的同时常伴随着光子的辐射。这种现象就是发光现象。荧光则属于分子的光致发光现象。
荧光分光光度计的构成
1. 光源:为氙弧灯,后者能发射出强度较大的连续光谱,且在300nm~400nm 范围内强度几乎相等,故较常用。
2.激发单色器:置于光源和样品室之间的为激发单色器或一单色器,筛选出特定的激发光谱。
3.发射单色器:置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器,爱丁堡荧光光度计公司,常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱。
4. 样品室:通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。测量液体时,Techcomp荧光光度计公司,光源与检测器成直角安排;测量固体时,Edinburgh荧光光度计公司,光源与检测器成锐角安排。
5. 检测器:一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。
荧光光谱
不同结构荧光化合物都有特征的激发光谱和发射光谱,北京荧光光度计公司,因此可以将荧光物质的激发光谱与发射光谱的形状、峰位与标准溶液的光谱图进行比较,从而达到定性分析的目的,在低浓度时,溶液的荧光强度与荧光物质的浓度成正比:F=Kc。其中,F为荧光强度,c为荧光物质浓度,K为比例系数。这就是荧光光谱定量分析的依据。
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